在日常當(dāng)中水體如果受到了污染,那就會造成水體具有毒性。因此在遇到水源水、地下水、湖泊河流等水體污染時,在不能確定污染源的情況下,水質(zhì)相關(guān)檢測人員首先要確定的就是此時的水體是否具有毒性,其程度如何,對于誤食、誤飲的生物是否具有危害性。
目前國家對水質(zhì)急性毒性限值及檢測都有相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn),水質(zhì)急性毒性目前有斑馬鮰魚卵和發(fā)光細(xì)菌等幾種方法。而發(fā)光細(xì)菌法指的是水樣在一定的時間和條件下與發(fā)光細(xì)菌接觸后,發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度變化與水樣中毒性組分總濃度呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,通過生物發(fā)光光度計測定水樣與發(fā)光細(xì)菌接觸一定時間后的發(fā)光抑制率來表征水樣的急性毒性水平。
1.實驗室超純水,常溫保存。
2.氯化汞母液(2000mg/L)。
3.復(fù)蘇稀釋液(0.85%的氯化鈉溶液)。
4.滲透壓液(17%的氯化鈉溶液)。
5.青?;【鶴67。
生物發(fā)光光度計技術(shù)規(guī)格:可探測光譜范圍,320nm~1000nm;探測結(jié)果范圍,0~65535 RLU ;最快檢測時間,5min;相對發(fā)光強(qiáng)度,0-200%;可進(jìn)行ATP測試;測試試管,規(guī)格為5ml的反應(yīng)試管和10ml的測試試管。
室溫20-25℃,同一批樣品在測試過程中要求溫度波動不超過±1℃。且所有測試器皿及試劑,溶液測前1h均置于控溫的測試室內(nèi)。
若需測定包括pH影響在內(nèi)的急性毒性,不應(yīng)調(diào)節(jié)水樣pH。
若需測定排除pH影響在內(nèi)的急性毒性,需將水樣和復(fù)蘇液(氯化鈉0.85g/100ml)pH測前調(diào)至下值:主要含銅的水樣為4.5,主要含其他金屬水樣為5.4,主要含有機(jī)化合物水樣為7.0。
與塑料或鐵制試管架上按以下要求排列試管架:
第一排,依次為反應(yīng)管01-標(biāo)準(zhǔn)品、反應(yīng)管02-陰性/陽性質(zhì)控和反應(yīng)管03-水樣;
第二排,依次為測試管01-標(biāo)準(zhǔn)品、測試管02-陰性/陽性質(zhì)控和測試管03-水樣。
從冷凍環(huán)境(-18℃)中取出青?;【鶴67凍干粉(含量約為0.0015-0.0018g)小瓶,在常溫環(huán)境(25℃左右)下放置15min后,啟開并輕敲小瓶,確保凍干細(xì)菌充分落在小瓶底部。移取0.5mL0.85%的復(fù)蘇液或3%的復(fù)蘇液至菌種中,搖勻,放置10min后可以使用。
打開生物發(fā)光光度計電源,預(yù)熱15min,調(diào)零,備用。
分別往三支反應(yīng)試管中加入2ml的標(biāo)準(zhǔn)品(稀釋液),2ml(1:19-稀釋液:樣品)的陰性質(zhì)控及2ml(1:19-稀釋液:樣品)的被測水樣;
待凍干粉復(fù)蘇時間到后,分別往反應(yīng)管中加入50ul凍干粉復(fù)蘇試劑(注意混勻);
混勻后,等待15min反應(yīng)時間;
分別從反應(yīng)試管中移取350ul混合液至測試管中(注意盡量不要濺到瓶壁上);
將測試試管按順序分別放入到主機(jī)中,最終結(jié)果以RLI%發(fā)光強(qiáng)度表示。